دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .
لینک پرداخت و دانلود *پایین مطلب*
فرمت فایل:Word (قابل ویرایش و آماده پرینت)
تعداد صفحه:24
فهرست مطالب
- وظیفه یک کارشناس بیماری شناس 6
- وسایل مورد نیاز در آزمایشگاه بیماری گیاهی 6
- Aven 7
- Autoclave 7
- Growth chamber 8
- Incubator 8
- Heater 8
- Petridish 9
- انواع محیط کشت 9
- ظروف شیشه ی 10
- میکروسکوپ 10
- بینی کولر 10
- ماکروفر 11
- شیکر 11
- جداسازی ارگانیسم بیماری زا 11
- روش خالص سازی قارچ 13
- روش نگهداری قارچ 14
- روش ساخت محیط کشت P.D.A 15
- روش ساخت محیط کشت N.A.S 15
- روش ساخت محیط کشت Y.D.C 16
- روش تهیه محیط کشت E.M.B 16
- روش تهیه محیط کشت شاهدانه 16
- Water Agar 16
- طرز کشت در محیط کشت زیر هود بیولوژیک 16
- شانکر در لیمو ترش 17
- تشخیص بیماری در سیب 17
- رنگ آمیزی گرم 17
- روش رنگ آمیزی گرم 17
- کلید کردن باکتری 18
- تشخیص بیماری انار 19
- تشخیص بیماری گردو 19
- تشخیص بیماری گردو 19
- تشخیص باکتری برنج 19
- بیماری که به صورت ماکروسکوپی مشاهده شد 20
- زنگ زرد گندم 20
- سیاهک معمولی ذرت 21
- سیاهک شاخی سورگوم 22
- سیاهک پنهان گندم 23
- پوسیدگی سفید ریشه 23
- مبارزه 24
گزارش کار ، کار آموزی
با سلام و احترام خدمت استاد محترم کارآموزی , این گزارش مربوط به ترم مهرماه سال
86 – 85 می باشد , که اینجانب در اداره حفظ نباتات شیراز به پایان رساندم .
وظیفه یک کارشناس بیماری شناس:
- نمونه ای را که برایش آورده اند بشناسد یا اگر نمی داند آن نمونه را برای کارشناس متخصص آماده کند .
- بعضی بیماریها بر حسب همان نمونه به سادگی قابل تشخیص اند.
- برخی دیگر باید نمونه برداری شده و زیر میکروسکوپ تشخیص داده شود . ( به میکروسکوپ , لام , لامل , سوزن کشت نیاز است )
- برخی دیگر باید نمونه برداری شود و در محیط مناسب کشت داده شود و جمعیت آن زیاد شود و اندامهای بخصوص تکثیر شوند وبعد تشخیص داده شود .
وسایل مورد نیاز در آزمایشگاه بیماریهای گیاهی :
- Aven
- Autoclave
- Growth chamber ( اتاقک کشت یا اتاقک رشد )
- تجهیزات کشت
- Incubator
- Heater و یخچال
- Petridish
- محیط کشت
- ظروف شیشه ای
- میکروسکوپ
- بینی کولر
- ماکروفر
- شیکر
- دیگر تجهیزات
1 – Aven :
دستگاهی است برای استریل کردن ظروف یا چیزهایی که ماهیت فلزی یا شیشه ای دارند . البته برای خشک کردن ظروف و همچنین خشک کردن خاک با درجه حرارت کم استفاده می شود .
سطوح ظرف کشت در حالت عادی دارای آلودگی است که این آلودگی شامل هر ارگانیسمی به جزء ارگانیسم مورد نظر است.
شرایط استریل در دستگاه آون :
- حرارت مورد نیاز دستگاه 180 درجه سانتی گراد است . و زمان مورد نیاز , حداقل نیم ساعت برای ظروفی که همه سطوحش در دسترس است اما برای ظروفی که انبوهی دارند زمان بیشتری نیاز است .
- استریل کردن بر اساس حرارت خشک و بدون بخار صورت می گیرد .
- اگر ظروف کشت دارای سطح پهن باشد و بخواهیم چند تا از آنها را هم زمان در آون بگذاریم باید حتما خشک باشند , چون بخار آب بین آنها فشار آورده و ظروف را می ریزد یا می شکند .
- هنگام باز کردن در دستگاه پشت در می ایستیم و در را باز می کنیم تا حرارتی که بیرون می آید باعث سوختگی شدید نشود .
2- Autoclave:
این دستگاه برای استریل کردن مواد مایع و آبکی یا خاک و آب است . و همچنین برای استریل کردن ظروفی که تا دمای 120 درجه سانتی گراد تغییر حالت نمی دهند مثل ظروف پلاستیکی استفاده می شود .
شرایط استریل در اتوکلاو :
- حرارت مورد نیاز 120 درجه سانتی گراد می باشد . زمان مورد نیاز 15 دقیقه و با فشار 1.5 اتمسفر می باشد .
- کار این دستگاه شبیه به کار زود پز است . البته فشار سنج , تنظیم درجه حرارت و سوپاپ هایی برای خروج هوا دارد .
- وقتی دستگاه کار می کند در آن را باز نمی کنیم .
- وقتی دستگاه خاموش است نیز با احتیاط د آن را باز می کنیم .
نکته : در دو دستگاه بالا زمان را از وقتی شروع می کنیم که به شرایط مربوطه رسیده باشد .
3- Growth chamber :
ظروفی که استریل شدند به اتاق کشت برده می شود , مواد کشت در آن ریخته می شود و در اتاقک کشت یا اتاقک رشد که استریل است باید قرار گیرد , تا آلودگی مجدد وارد ظروف نشود .
4- تجهیزات کشت :
شامل سوزن , پنبه , الکل , میز کار یا سطحی که روی آن کار کنیم که باید فلزی باشد یا شیشه ای که حتما باید استریل باشد , فضای داخل اتاق کشت باید استریل باشد که این کار با لامپ اشعه ماوراء بنفش انجام می شود . که معمولا چند لامپ U.V در اتاق کشت نیاز است ( زمانی که چراغ روشن است نباید در اتاق باشیم ) .
5- Incubator :
دستگاهی که شرایط مناسب و لازم برای رشد ارگانیسم را اعم از حرارت , رطوبت و نور فراهم می کند .حرارت از همه موارد مهمتر است . بعضی ارگانیسم ها ممکن است احتیاج به نور داشته باشند و برخی همان رطوبت خاص خودشان کافیست . برای اغلب ارگانیسم ها حرارت 30 – 25 درجه سانتی گراد مطلوب است . بهتر است درجه حرارت را روی 27 درجه بگذاریم ( البته در صورتی که نمی دانستیم ارگانیسم سرما دوست است یا گرما دوست ) که اگر گرما دوست بود درجه بالاتر می بریم و در غیر اینصورت درجه را پایین تر نمی آوریم .
6- Heater و یخچال :
از هیتر برای گرم کردن مواد و هر چند با زیاد کردن آن برای به هم زدن مواد نیز استفاده می شود . در آزمایشگاه ما بیشتر برای گرم کردن و یکنواخت کردن محیط کشت هایی که تهیه کردیم قبل از اتوکلاو استفاده می شد .
در انکوباتور درجه حرارت را به وسیله این دو دستگاه تنظیم می کنیم مثلا وقتی درجه حرارت محیط 30 درجه سانتی گراد است نمی توانیم 27 درجه را تنظیم کنیم بنابراین دستگاه حتما باید هیتر داشته باشد . زمانی که درجه به 27 رسید هیتر به طوراتوماتیک خاموش می شود ، ولی چون داخل دستگاه گرم است و حرارت بالاتر از 27 درجه می رود ، یخچال یا خنک کننده دستگاه به طور اتوماتیک شروع به کار می کند حرارت را پایین می آ ورد . دستگاه 2- 3 درجه نوسان حرارت دارد .
7- Petridish :
ظرف مناسبی برای کشت که در اندازه های مختلفی ساخته می شود با جنس شیشه ای یا پلاستیکی یک بار مصرف. ظرف های یکبار مصرف با اشعه گاما استریل و بسته بندی شده اند و دیگر احتیاج به استریل شدن ندارند. قطر پتری دیش حدود 9 – 8 سانتی متر است . وقتی که کار تحقیقاتی انجام می دهیم و می خواهیم مثلا برخی ارگانیسم ها را به طور انبوه تولید کنیم از پتری دیش به قطر 30 سانتی متر استفاده می شود .
8 – محیط کشت :
- General medium ( محیط کشت عمومی ) :
مثل محیط کشت P.D.A , C.M.V , N.A.S , L.B.A که اغلب ارگانیسم ها می توانند روی آن رشد می کنند . هر ارگانیسمی که بتواند کلیه نیاز های خود را از این محیط دریافت کند , بدون هیچ محدودیتی رشد می کند .
- Selective medium (محیط کشت انتخابی ) :
اگر به محیط کشت عمومی موادی اضافه کنیم که نیازهای غذایی ارگانیسم مورد نظر ما باشد و یا حتی ممانعت کننده هایی برای جلوگیری آلودگی های دیگر باشد یک محیط کشت انتخابی داریم . مواد محرکی مثل انواع ویتامین ها , اسیدهای آمینه , قندها و یا مواد ممانعت کننده رشد مثل آنتی بیوتیک ها , اسیدها و سموم.که مثلا با اضافه کردن موادی نظیر بعضی از قارچکشها مانند بنومیل – مانکوزب تهیه می شود.
- Specific medium ( محیط کشت اختصاصی ) :
انواع آنتی بیوتیک ها و سموم و ممانعت کننده ها ی رشد را اضافه می کنیم که جلوی رشد همه ارگانیسم ها جز ارگانیسم مورد نظر ما یا محرک هایی که فقط رشد ارگانیسم مورد نظر ما را ایجاد کنند.
- انواع محیط کشت از نظر انواع مواد سازنده محیط کشت :
- طبیعی :
محیطی است که از مواد طبیعی پیچیده استفاده می شود و ترکیبات محیط کشت برای ما معلوم نیست .
- مصنوعی:
محیطی است که تمام ترکیباتش از مواد سازنده مختلف با میزان مشخص باشد . مثلا K2HO4 + NANO3 + NACL با میزان مشخص .
9 – ظروف شیشه ای :
برای مایعاتی که خطر اشتعال دارند استفاده نمی شود . وکلا تجهیزات دیگر مثل ارلن , بورت , بشر , لوله آزمایش , . . . در آزمایشگاه مورد نیاز است .
10 - میکروسکوپ و طرز کار آن :
میکروسکوپ وسیله ای است برای دیدن میکرو ارگانیسم هایی که با چشم قابل دیدن نیستند و اسلاید ها یی که از پاتوژن ها تهیه می شود . دارای چهار عدسی 4, 10 , 40 و 100 می باشد .
